Выявление возбудителей Сибирской язвы.
Выявление возбудителей Сибирской язвы.
Сущность метода выявления бацилл сибирской язвы заключается в определении их характерной морфологии в мазках-отпечатках, типичного роста на питательных средах и установлении патогенности путем заражения лабораторных животных.
Бациллы сибирской язвы обнаруживают в три последовательных этапа: бактериоскопия мазков из патологического материала; получение и изучение свойств чистой культуры на питательных средах; биологическая проба на лабораторных животных и при необходимости серологическое исследование. В случае доставки загнившего материала исследование проводят только по реакции преципитации.
Реактивы
Реактивы для определения индола.
Реактив Эрлиха.
1 г пара-диметиламинобензальдегида растворяют в 95 см3 96°-ного этилового спирта и добавляют 20 см3 соляной кислоты. Реактив хранят без доступа света.
Реактив Ковача.
5 г пара-диметиламинобензальдегида растворяют в 75 см3 амилового спирта при нагревании на водяной бане при температуре 50—55 °С, охлаждают и добавляют 25 см3 концентрированной соляной кислоты. Реактив имеет желтую окраску, хранят его в холодильнике при температуре 4 °С.
Проведение исследования на рожу свиней.
При подозрении на происхождение мяса от животных, больных рожей, проводят микроскопию мазков-отпечатков, посевы на питательные среды и при необходимости заражение лабораторных животных. При подозрении на рожу из органов делают мазки-отпечатки с окраской по Граму и мазки для исследования методом флуоресцирующих антител. При хроническом течении болезни мазки делают и из пораженных клапанов сердца.
Морфологические и культуральные свойства. В положительных случаях в мазках, окрашенных по Граму, обнаруживает тонкие, прямые или слегка изогнутые грамположительные палочки, расположенные одиночно, попарно или скоплениями. При хроническом течении болезни в мазках из пораженных клапанов сердца обнаруживают длинные переплетающиеся нити.
При применении метода флуоресцирующих антител обработку и окраску мазков проводят в соответствии с Наставлением по применению сухих рожистых люминесцирующих сывороток (для прямого метода иммунофлуоресценции).
Проведение исследования на листериоз.
При подозрении на листериоз бактериологическая диагностика включает микроскопическое исследование исходного материала, посевы на питательные среды, идентификацию выделенных культур по культурно-биохимическим и серологическим свойствам, а также постановку биологической пробы на лабораторных животных.
Морфологические и культуральные свойства. Микроскопическому исследованию подвергают тонкие мазки-отпечатки из головного мозга, внутренних органов и тканей. При приготовлении мазков-отпечатков - чистым предметным стеклом 3—4 раза прикасаются к поверхности среза органа. Мазки готовят непосредственно из материала, а также после выдержки (подращивания) проб в термостате в течение 4—6 часов. Мазки окрашивают по Граму, а также методами флуоресцирующих антител.
Возбудитель листериоза — полиморфная, чаще палочковидная бактерия длиной 0,5—2,0 мкм; она хорошо окрашивается всеми анилиновыми красками, грамположительна (однако в старых культурах могут встречаться единичные грамотрицательные палочки).
Проведение исследования на пастереллез.
При проведении бактериологического исследования на пастереллез и дифференциации выделенных культур от возбудителей рожи свиней и листериоза необходимо учитывать, что пастереллы в мазках-отпечатках из паренхиматозных органов, окрашенных синькой Леффлера, по Романовскому—Гимзе или Граму, представляют собой короткие с закругленными концами овоидные палочки-биполяры.
При росте на простом, аминопептидном, сывороточном и яичном МПА колонии пастерелл серовато-белого цвета, прозрачные, крутые, выпуклые, с ровными краями, их диаметр достигает 2—3 мм.